液相色譜柱填料可以由基質直接構成，如硅膠、氧化鋁、高交聯度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等；也可以在這些基質的基礎上涂布或化學鍵合固定液來構成。與液相色譜柱的性能相關的因素很多，基質或者說擔體、載體的化學性質、鍵合相（固定液）的化學性質、填料形狀大小粒度分布、碳量和鍵合度等等。
液相色譜柱中的流動相是否會排干
不少做色譜分離試驗的人遇到過這樣的情形：不慎未及時補充流動相，泵將溶劑瓶中的流動相吸干了，HPLC系統由此而停止工作了。
如此情況是否會損壞色譜柱？泵是否已將色譜柱中所有流動相都排干了？液相色譜柱還能使用嗎？
事實上，如果泵將溶劑瓶中的流動相吸干，并不會造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿了空氣，泵也不會將空氣排入色譜柱。因為泵只能輸送液體，而不能輸送空氣。相比之下，另一個更可能發生的情況是忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。
同樣，整個色譜柱干涸的情況不太容易發生，多半可能只是色譜柱兩端的幾個毫米變干了，因揮發掉所有溶劑是色譜柱變干需要相當長的時間。
即使色譜柱真的變干了，也不一定就不可救藥了。可以嘗試用一種*脫氣的、表面張力低的溶劑沖洗色譜柱以除去氣體。較低的表面張力有助于浸潤填料表面；已脫氣的溶劑應該能夠溶解并去除滯留在填料中的氣體。大約需要沖一個小時或更多的時間被*浸潤，恢復到正常狀態。
利用色譜柱先將混合物分離，然后利用檢測器依次檢測已分離出來的組分。液相色譜柱的直徑為數毫米，其中填充有固體吸附劑或液體溶劑，所填充的吸附劑或溶劑稱為固定相。與固定相相對應的還有一個流動相。
