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UHPLC反相色譜柱的使用和操作方式

更新日期：2021-05-23 信息來(lái)源：本站瀏覽次數(shù)：3706

　　UHPLC反相色譜柱是一種具有*碳載量的固定相。高碳鏈覆蓋度使其具有密集的鍵和優(yōu)異的形狀選擇性，在PH低至1的環(huán)境中仍能保持良好的穩(wěn)定性。它主要應(yīng)用于傳統(tǒng)的C18柱無(wú)法分離的類(lèi)胡蘿卜素的異構(gòu)體和其他長(zhǎng)烴基物質(zhì)的分離。

　　UHPLC反相色譜柱的使用：

　　在使用前，進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來(lái)，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行，只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。

　　UHPLC反相色譜柱的操作方式：

　　1、在條件允許情況下，在使用前對(duì)新色譜柱按照說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行柱效測(cè)試。以確保色譜柱的正常。

　　2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。

　　3、樣品

　　將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過(guò)濾。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑（例如，流動(dòng)相為水，樣品溶劑為甲醇），為達(dá)到較好峰形，需要降低進(jìn)樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例，小于10μL）。

　　4、流動(dòng)相

　　所有流動(dòng)相，特別是含有緩沖鹽的流動(dòng)相，當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制；如果使用了前日配制的流動(dòng)相，請(qǐng)確保流動(dòng)相pH值沒(méi)有變化，并確保流動(dòng)相沒(méi)有長(zhǎng)菌。流動(dòng)相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類(lèi)型。

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