共創共贏
氯霉素由于其較強的毒副作用，許多國家禁止在食用動物飼養和治療中使用；我國也明令其作為獸藥禁用，且所有動物可食組織均不得檢出。因此，研究一種、靈敏的檢測乳品中氯霉素殘留量方法，對我國的進出口貿易以及食品安全將具有重要意義。我國農業部于2002年發布的第193號公告中規定禁止生產、經營和使用氯霉素，在可食性動物組織中不得檢出氯霉素。
方法優勢：
對比《GB 29688-2013 食品安全國家標準 牛奶中氯霉素殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法》，本方案具有如下優勢：
1、適用范圍
適用于牛奶、奶粉等乳制品中氯霉素的檢測，牛奶的檢出限是0.01 μg /kg，定量限是0.1 μg /kg；奶粉的檢出限是0.05 μg /kg，定量限是0.5 μg /kg。
2、提取
(1) 取10 mL牛奶樣品(或2 g奶粉樣品、10 mL水)，加10 mL 乙腈，渦旋1 min；
(2) 加10 mL 乙腈、2 mL乙酸鉛(200 g/L)、4 g 氯化鈉，渦旋2 min，7000 rpm下離心3 min，收集上清液；
(3) 取10 mL上清液，待凈化。
3、凈化—ProElut DPC 3 g/12 mL（Cat.#65353）
a活 化： | 10 mL乙腈活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，收集流出液； |
c洗 脫： | 加入10 mL乙腈，收集流出液，合并步驟b和步驟c流出液； |
d重新溶解： | 將流出液在40 ℃下減壓蒸餾至干，用水定容至1 mL，供UPLC-MS/MS分析。 |
4、色譜條件
4.1 液相條件
色譜柱：Endeavorsil C18, 100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm（Cat.# 87003）
流 速：0.2 mL/min 進樣量：5 μL 柱 溫：40 ℃
流動相：A：10 mmol/L乙酸銨溶液 B：乙腈
梯度設置
時間/Min. | 0 | 4 | 4.5 | 6 | 6.5 | 12 |
A（%） | 20 | 50 | 90 | 90 | 20 | 20 |
B（%） | 80 | 50 | 10 | 10 | 80 | 80 |
4.2 質譜條件
電離模式： | ESI | 掃描方式： | 負離子掃描 |
檢測方式： | 多反應監測 | 電噴霧電壓： | -4500 V |
霧化氣壓力： | 50 psi | 輔助氣壓力： | 50 psi |
氣簾氣壓力： | 20 psi | 離子源溫度： | 500 ℃ |
定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表
藥物名稱 | 定性離子對 （m/z） (母離子/子離子) | 定量離子對 （m/z） (母離子/子離子) | 碰撞氣能量/V | 去簇電壓/V |
氯霉素 | 321.0/151.8 | 321.0/151.8 | -24 | -80 |
321.0/256.9 | -15 |
5、添加回收結果
牛奶和奶粉中氯霉素的UPLC-MS/MS檢測添加回收結果
基質 | 分析物 | 添加水平(μg/kg) | 回收率(%) |
牛奶 | 氯霉素 | 0.2 | 87.8 |
奶粉 | 氯霉素 | 1.0 | 82.6 |
乳制品中氯霉素的測定SPE-UPLC/MS/MS解決方案相關產品信息
貨號 | 名稱 | 規格 |
樣品前處理 | ||
65353 | 乳品中農、獸藥檢測柱 ProElut DPC | 3 g/12 mL, 20/pkg |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
37177 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
37180 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
色譜柱及保護柱 | ||
87003 | 超液相色譜柱 Endeavorsil C18 | 100 × 2.1 mm，1.8 μm |
標準品 | ||
50P-C11120000 | 氯霉素[56-75-7] | 250 mg |
HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50138 | 乙酸銨 HPLC級 | 100 g |
通用色譜產品 | ||
52401B | 瓶架/藍色 | 50 孔 |
52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
5323 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
5325 | 樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） | 100/pk |
