共創共贏
食品中對羥基苯甲酸酯類化合物的測定
SPE-HPLC法
對羥基苯甲酸酯是一類有機化合物，主要用作有機合成、食品、化妝品、醫藥的殺菌防腐劑，也用作于飼料防腐劑。其防腐效果優于苯甲酸及其鈉鹽，主要用于醬油、果醬、清涼飲料等。
食品安全國家標準《GB 5009.31-2025食品中對羥基苯甲酸酯類化合物的測定》于2025年3月16日發布并將于2025年9月16日實施。
迪馬科技依據此標準第二法 高效液相色譜法，建立了食品中對羥基苯甲酸酯類化合物的測定方法。使用ProElut® PXA(Cat.#:68305)固相萃取柱進行樣品凈化，Diamonsil® Plus 3μm C18, 150x4.6mm(Cat.#:99421)色譜柱分離檢測對羥基苯甲酸酯類化合物，方法定量限為2mg/kg，回收率在83%~114%之間。
該方法相較國標，迪馬科技前處理優化了部分樣品的提取和凈化方法，鮮水果、新鮮蔬菜、面醬這類樣品使用甲醇提取兩次，將合并的提取液用水稀釋至濃度為50%的甲醇再凈化；果醬樣品，減少加入濃氨水的量，使樣品提取液能夠更加順暢地通過固相萃取柱。
色譜分離方面，雜質較少的樣品使用標準液相梯度條件進行分離和檢測，針對部分雜質較多樣品，如醋、醬油、面醬等，在標準液相梯度條件基礎上進行微調，這些樣品在檢測時能夠使對羥基苯甲酸酯類化合物與大部分雜質達到較好的分離效果，保證結果的穩定性及重現性。
本方案適用于白菜、黃瓜、蘋果、面醬、醋、醬油、橙汁和果醬等樣品中對羥基苯甲酸酯類化合物的測定，定量限為2mg/kg。
(1) 對羥基苯甲酸酯類化合物1000μg/mL標準儲備液(Cat.#:48677)：準確稱量10mg各對羥基苯甲酸酯類化合物于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。
(2) 對羥基苯甲酸酯類化合物100μg/mL標準中間液：準確吸取1mL對羥基苯甲酸酯類化合物1000μg/mL標準儲備液(Cat.#:48677)于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。
3.1 白菜、黃瓜、蘋果、面醬等
取5g樣品于50mL離心管中，加入10mL甲醇，渦旋振蕩10min，超聲20min，8000rpm離心5min，收集全部上清液于另一50mL離心管中，向殘渣中再加入10mL甲醇，重復提取一次，合并兩次提取液，加水至40mL，混勻，8000rpm離心5min。取20mL上清液，待凈化。
3.2 醋、醬油等
取5g樣品于50mL離心管中，加入5mL水，渦旋振蕩10min，加入10mL甲醇，渦旋振蕩10min，超聲20min，8000rpm離心5min，收集全部上清液于另一50mL離心管中，向殘渣中再加入10mL甲醇-水溶液(2+8)，重復提取一次，合并兩次提取液，加水至40mL，混勻，8000rpm離心5min。取全部上清液，待凈化。
3.3 橙汁等
取5g樣品于50mL離心管中，加入30mL甲醇-水溶液(3+7)，渦旋振蕩10min，超聲20min，再加入甲醇-水溶液(3+7)至40mL，混勻，8000rpm離心5min。取全部上清液，待凈化。
3.4 果醬等
取5g樣品于50mL離心管中，加入1mL濃氨水、4mL水，渦旋振蕩10min，放置1小時，加入10mL甲醇，渦旋振蕩10min，超聲20min，8000rpm離心5min，收集全部上清液于另一50mL離心管中，向殘渣中再加入10mL甲醇-水溶液(2+8)，重復提取一次，合并兩次提取液，加水至40mL，混勻，8000rpm離心5min。取全部上清液，待凈化。
4.1 白菜、黃瓜、蘋果、面醬等，提取后使用此凈化方法
ProElut® PXA 500mg/6mL(Cat.#:68305)
(1)活化：依次加入5mL甲醇、5mL水，棄去流出液；
(2)上樣：將待凈化液加入柱中，棄去流出液；
(3)淋洗：依次加入5mL水、5mL甲醇-水溶液(5+5)，推干小柱，棄去流出液；
(4)洗脫：加入5mL甲醇，洗脫完畢后，推干小柱，收集所有流出液；
(5)定容：加甲醇定容至5mL，過0.22μm PTFE濾膜(Cat.#:37178)，上機分析。
凈化過程全程控制流速1滴/s。
4.2 醋、醬油、橙汁、果醬等，提取后使用此凈化方法
ProElut® PXA 500mg/6mL(Cat.#:68305)
(1)活化：依次加入5mL甲醇、5mL水，棄去流出液；
(2)上樣：將待凈化液加入柱中，棄去流出液；
(3)淋洗：依次加入5mL水、5mL甲醇-水溶液(3+7)，棄去流出液；
(4)洗脫：加入6mL甲醇(果醬樣品使用6mL 2%甲酸甲醇溶液洗脫)，收集流出液；
(5)定容：加水定容至10mL，過0.22μm PTFE濾膜(Cat.#:37178)，上機分析。
凈化過程全程控制流速1滴/s。
色譜柱：Diamonsil® Plus 3μm C18, 150x4.6mm(Cat.#:99421)
流速：0.7mL/min
進樣量：10μL
柱溫：35℃
檢測器：PDA 254nm
流動相：A：0.1%磷酸水溶液 B：乙腈
白菜、黃瓜、蘋果、面醬、醋、醬油、橙汁和果醬等中對羥基苯甲酸酯類化合物測定的添加回收結果。
下載方案